水中 SARS-CoV-2 RT-PCR
检测试剂盒

     

公共卫生研究表明, 在新型冠状病毒 (COVID-19) 大流行期间, 对污水进行 SARS-CoV-2 新冠病毒检测是一个重要的流行病学工具。1,2

水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测是一种实时逆转录聚合酶链反应检测 (RT-qPCR), 用于定量检测未经处理的污水中 SARS-CoV-2 中的核酸。在拥有 20 多年生产污水检测试剂盒经验的行业领导者的支持下, 公共卫生部门、研究人员和实验室可以放心地提供一致的结果, 以保护他们的社区。3

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概况

已经过验证

  • 由市场领先的污水检测工具制造商验证的方案, 包括 科立得/Quanti-Tray 51孔或97孔定量盘方法
  • 方案灵活可以满足不同的检测需求
  • 可在常用的实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 仪器上进行实验3

一致性

  • 高灵敏的 RT-qPCR 检测, 同时可检测病毒的 N1 和 N2 区域3
  • 完善的质量控制方案, 保证结果一致性

可用

  • 具有悠久历史的供应链: IDEXX 对关键产品的供货超过 99.9%3
  • 无菌和稳定一致的制造设施, 符合 ISO 和 GMP 标准
  • 拥有数十年污水处理经验的技术支持人员

如何使用

 

浓缩

 

RNA核糖核酸提取

 

实时荧光定量检测 (RT-PCR)

第 1 步在 60°C 下对样本进行 1.5 小时的巴氏杀菌。这一步是可选的。

第 2 步使用聚乙二醇沉淀法或其他等效方法对样本进行浓缩。

第 3 步使用水中脱氧核糖核酸/核糖核酸磁珠试剂盒 (Water DNA/RNA Magnetic Bead Kit) 提取核糖核酸。

第 4 步用水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测试剂盒扩增纯化的核酸。

产品说明书

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常见问题

水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测是一种实时逆转录聚合酶链反应检测 (RT-qPCR), 可对采用适当方法制备的污水浓缩液样本进行病毒RNA的定量检测。

当与 105 ml 浓缩液样本一起使用时, 通过水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 可检测试剂盒检测到的污水中 SARS-CoV-2 的最低浓度约为 1 个基因拷贝/毫升。

经 IDEXX 验证的方案可从 105 毫升污水中浓缩 SARS-CoV-2 病毒。实验室工作人员可以使用适当的离心设备, 根据不同的输入量来执行相应的基本程序, 从而分析更多或更少的水量。

水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测试剂盒分析从污水浓缩样本中提取的 RNA。我们建议采集额外的量来解决移液损失和样本复检的问题。

经 IDEXX 验证的方案通过离心和PEG聚乙二醇沉淀法相结合来浓缩污水样本, 并可根据您的实验室需求进行更改。也可以使用其他浓缩方法, 如超滤、歧管过滤等。应对这些方法进行验证, 以确定其性能。

保持样本处于一个较低的温度, 有助于防止样本降解并确保 SARS-CoV-2 病毒的有效沉淀。

经过验证, “水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测试剂盒”可以和“水中脱氧核糖核酸/核糖核酸磁珠试剂盒” (Water DNA/RNA Magnetic Bead Kit) 一起使用, 用于从污水浓缩物中提取新冠病毒核酸, 包括 SARS-CoV-2 RNA。此磁珠试剂盒可以手动运行, 也可以使用自动磁分离处理器执行。如需了解更多详细信息, 请阅读产品说明书。

对于通过“水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测试剂盒”测试的每组污水样本, 应同时分析 PCR 阳性对照品、PCR 阴性对照品、阳性对照提取物和阴性对照提取物。还必须进行方法控制, 以验证预期结果。

请参考产品说明书, 了解产品接收时以及在重建/首次使用后的建议储存条件。

美国疾病控制和预防中心 (CDC) 指出, 具有额外预防措施的二级生物安全 (BSL-2) 实验室可用于环境样本检测, 包括处理和加工与 SARS-CoV-2 相关的污水样本。可从美国疾病控制和预防中心获得具体的指引: 《与 2019 年冠状病毒病 (COVID-19) 有关的样品处理和加工的临时实验室生物安全指南》[Interim Laboratory Biosafety Guidelines for Handling and Processing Specimens Associated with Coronavirus Disease 2019 (COVID-19)]4

有关具体建议, 请咨询您当地的卫生部门。

请遵循当地卫生部门建议的程序来处理与 SARS-CoV-2 相关的污水样本。美国疾病控制和预防中心公布了一个信息来源: 《与 2019 年冠状病毒病 (COVID-19) 有关的样本处理和加工的临时实验室生物安全指南》[Interim Laboratory Biosafety Guidelines for Handling and Processing Specimens Associated with Coronavirus Disease 2019 (COVID-19)]4

请遵守所有当地法规和安全准则。 

如有需要, 可通过热处理方法 (例如巴氏灭菌) 使样本失活。有关示例, 请参见产品说明书。 

巴氏杀菌可能会降低 SARS-CoV-2 RNA 的检测回收率。如需更多信息, 请联系 IDEXX 的客户代表。

根据当地法规和指引处理所有样本和材料。

水中 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测试剂盒尚未获得美国环境保护局的批准用于测试污水中的 SARS-CoV-2。美国环境保护局目前没有规定污水 SARS-CoV-2 测试的流程或批准用于此目的的测试方法。污水中 SARS-CoV-2 的检测可能受您当地和/或州当局的监管, 也可能不受其监管。请检查您所在地区可能适用的规定。

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参考文献

  1. Wurtzer S, Marechal V, Mouchel J-M, et al. Evaluation of lockdown impact on SARS-CoV-2 dynamics through viral genome quantification in Paris wastewaters [preprint posted May 6, 2020]. medRxiv. doi:10.1101/2020.04.12.20062679
  2. Medema G, Heijnen L, Elsinga G, Italiaander R, Brouwer A. Presence of SARS-Coronavirus-2 in sewage [preprint posted March 30, 2020]. medRxiv. doi:10.1101/2020.03.29.20045880
  3. 数据保存于 IDEXX Laboratories, Inc. Westbrook, Maine USA.
  4. Centers for Disease Control and Prevention. Interim laboratory biosafety guidelines for handling and processing specimens associated with Coronavirus Disease 2019 (COVID-19). www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/lab-biosafety-guidelines.html. Revised June 3, 2020. Accessed July 7, 2020.