科立得


   

科立得可同时检测或测定总大肠菌群和大肠埃希氏菌或粪大肠菌群,24 小时内可得到结果。

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概况

经验证
  • 通过GB5750《生活饮用水标准检验方法》;HJ1001《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》,及在全球 20 多个国家及组织(AOAC、IBWA、EBWA)获批或得到认可。  
  • 每年在全球的检测多达数百万次。

简单
  • 操作简单,简化了培训流程。
  • 培养基独立包装,无需准备培养基。
  • 不必由于过滤器堵塞或异养生物的干扰而重复检测。
  • 15 分钟内便可完成质量控制(QC)操作步骤。

快速
  • 手工操作时间不超过 1 分钟。
  • 不到 24 小时便可同时检测大肠菌群和大肠埃希氏菌。
  • 无需确认实验。
  • 无需清洗玻璃器皿,无需菌落计数。
     
准确
  • 特异性检测大肠埃希氏菌,排除非目标菌干扰。
  • 最多可抑制 100 mL 水样中的 2 百万个异养生物。
  • 消除了传统方法中对结果主观解释的人为误差。
  • 可检测每个样品中1个总大肠菌群、大肠埃希氏菌或粪大肠菌群。
     
经济实惠
  • 减少晚间和周末工作。
  • 室温下的保质期长达 12 个月。
     
灵活

科学原理

科立得利用专利技术固定底物技术酶底物法(DST),同时检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌。科立得采用ONPG 和 MUG 这两种营养指标剂。这两种指示剂分别会被大肠菌群酶——β-半乳糖苷酶和大肠埃希氏菌酶——β-葡萄糖醛酸苷酶代谢。

当总大肠菌群在科立得中生长时,可利用 β-半乳糖苷酶代谢 ONPG,使样品从无色变成黄色。 

大肠埃希氏菌利用 β-葡萄糖醛酸苷酶分解 MUG,产物有荧光。由于大多数非大肠菌群没有这些酶,他们就无法生长,也就不能干扰实验结果。仅有的几种含有这些酶的非大肠菌群的生长,也被科立得检测专有的配方基质有选择性地抑制住了。

这种方法与传统的培养基法不同。传统的培养基法为目标生物体和非目标生物体都提供了一个营养丰富的环境,促进他们的生长。当非目标生物体繁殖,模仿目标生物体时,也就有了假阳性的出现。在传统培养基中,非目标生物体的生长还可抑制目标生物体的生长,导致假阴性结果。为了抑制非目标生物,传统培养基中常有高含量的盐、洗涤剂或其他选择性试剂,这在不经意间抑制了目标生物体的生长,进一步导致假阴性结果。

只有 IDEXX 试剂经验证并获得批准,可与 Quanti-Tray 51孔定量盘 和 Quanti-Tray/2000 97孔定量盘 配套使用。

如何使用

 

了解如何使用科立得检测


定性检测


第 1 步

将试剂加到样品中后,在 36°C ± 1°C 下培养 24 小时。

第 2 步

读取结果:

  • 无色 = 阴性
  • 黄色 = 总大肠菌群
  • 黄色且显荧光 = 大肠埃希氏菌

定量检测


第 1 步

将试剂加到样品中。

 

第 2 步

将其倒入 Quanti-Tray 51孔定量盘(计数范围 1~200)或 Quanti-Tray/2000 97孔定量盘(计数范围 1~2419)。

 

第 3 步

使用 Sealer Plus 程控定量封口机封口后,放入恒温箱,在 36°C ± 1°C 下培养 24 小时(其他国家的法规对温度的要求可能有所不同)。

 

第 4 步: 51孔定量盘法

Quanti-Tray 51孔定量盘——读取结果:

  • 黄色孔 = 总大肠菌群
  • 黄色且显荧光孔 = 大肠埃希氏菌
  • 记下有阳性反应的孔数,并查阅 MPN 表

第 4 步: 97孔定量盘法

Quanti-Tray/2000 97孔定量盘——读取结果:

  • 黄色孔 = 总大肠菌群
  • 黄色且显荧光孔 = 大肠埃希氏菌
  • 记下有阳性反应的孔数,并查阅 MPN 表

常见问题

 

应避光存储在 2~30°C 下。

科立得阳性比色/对照物是一种液体颜色和荧光性的参考对照。使用该对照的目的是辅助区分只有轻度阳性反应和阴性检测结果。

在 24~28 小时间,任何与对照物相同或比对照物更深的黄色或荧光性,都被认定为阳性检测结果。

科立得 试剂粉末应该是干燥的,能自由移动的白色或接近白色的粉末。如果有任何关于粉末颜色或质量问题,可询问 IDEXX 技术服务部 400-678-6682转2 水质检测部。

如果是阴性结果,则可以读取。如果不小心使已接种的 科立得 样品的培养时间超过 28 小时,没有黄色为有效的阴性结果;28 小时后出现的黄色为无效结果,应重新复测或验证结果。

如果是阳性结果,则有效。如果已接种的 科立得 样品在 24 小时前同时显示总大肠菌群和大肠埃希氏菌阳性,则为有效的大肠菌群及大肠埃希氏菌阳性结果。如果样品在 24 小时前仅为总大肠菌群阳性,这个结果为有效的总大肠菌群阳性检测结果。但应将样品再培养一段时间(最长可达 24 小时,但总培养时间不要超过 28 小时),从而确定是否有大肠埃希氏的存在。

这个试剂系统旨在抑制非大肠菌群 ONPG 或 MUG 阳性细菌的生长至少 28 小时。如果培养时间超过 28 小时,这些细菌可能会克服 科立得 检测的抑制系统,与 ONPG 或 MUG 反应。若培养时间超过 28 小时,只有阴性结果是有效的。必须使用传统方法对阳性结果进行确认。

请按照当地或政府对细菌生物危害材料的规定进行处理。在中国可以把阳性盘放入灭菌袋中进行高温高压灭菌(121℃,20分钟)。如需灭菌袋,请联系IDEXX技术服务部 400-678-6682 转2 水质检测部门。

科立得 检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌或粪大肠菌群的最低检出限为 1 个/100 mL。

科立得 SNAP包装(100 mL)的保质期是自生产之日起 12 个月。 

文献和产品配件

产品信息

科立得 检测试剂(200 次/包)
目录编号:WP200I

 

资源

IDEXX 水质部门有一些参考材料和批准文件,能为我们水系列中的很多产品提供支持。点击下方链接,找到您需要的文件。

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